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技術服務> 穩定株構建
cas9大片段刪除細胞系構建

服務簡介:

在傳統的基因敲除方案中,同源重組法通常用來可以敲除一個或多個外顯子。這種基因敲除方法有幾個缺點,如需要胚胎干細胞、載體構建復雜、耗時且花費大、敲除片段通常較短。近年來利用鋅指核酸內切酶(ZFN)、轉錄激活樣效應因子(TALEN)和成簇間斷短回文重復序列及其相關內切酶(CRISPR/Cas9)進行基因敲除,通常是利用非同源末端連接造成的移碼突變使編碼基因移碼而失活。

在哺乳動物基因組中,約80%的序列是非編碼的,這些非編碼的基因也被證明有重要功能。對于這些非編碼基因,有時移碼突變或者部分外顯子的缺失并不能有效使其功能失活,只有大片段的切除基因序列才能達到敲除目的。

lncRNA,即長鏈非編碼RNA,是長度大于200個核苷酸的非編碼RNA,是近些年的研究熱點。吉滿生物提供針對lncRNA的RNAi質粒構建及病毒包裝服務。另外,由于某些lncRNA會定位于細胞核,或者同時存在于胞漿及胞核中,傳統RNAi方法很難實現有效干擾。吉滿生物針對這一情況,結合CRISPR/Cas9技術,開發出基于CRISPR/Cas9的大片段刪除項目,非常適合于lncRNA的敲除應用。
推薦使用:

1.  廣泛應用于分子克隆、基因打靶細胞系構建、基因打靶動物模型構建以及相關的其他實際應用中。

服務流程:

其他相關服務:

1.  lncRNA慢病毒;
2.  Easy RNAi慢病毒構建與包裝;
3.  miRNA慢病毒;
4.  dcas9轉錄抑制。

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